菌种保藏(culture preservation)是确保微生物菌株活力和遗传信息稳定的重要技术手段。在生物医学研究中,不论是经过基因编辑还是其他改造的菌种,均属珍贵资源,因此需要进行科学有效的保藏。下面是具体的操作步骤:
菌种保藏操作步骤
首先,将待保存的菌液与配好的甘油混合液按1:1的比例混合,最终使甘油浓度达到20%。为此,需配置40%(v/v)的甘油灭菌水混合液。取2ml的离心管或保菌管,加入500微升的40%甘油-水混合液。接着,用移液枪吸取500微升的菌液,注意将枪头深入液面以下缓慢加入。最后,将离心管或保菌管放入-80℃的冰箱进行保存。为方便日后识别,请在保菌管上详细标明日期、菌种及抗性等信息。
菌液复苏操作步骤
复苏保存的菌液后,可进行后续实验。主要步骤如下:准备含有抗性的LB培养基,每个培养管约加入八毫升。在无菌操作台上,向每管加入100微升的菌液,放入37℃、180rpm的摇床中培养12小时。至于氨苄抗性的配置,1g氨苄青霉素钠需溶解于10ml灭菌水中,过滤后置于-20℃保存。而LB培养基的配置则是将10g氯化钠、10g胰蛋白胨及5g酵母提取物溶解于一升的水中,分装到250ml锥形瓶,每瓶100ml。最后,在100ml的培养基中加入100微升氨苄抗性以确保其有效性。
通过以上简单的步骤,您可以有效地保藏和复苏有价值的菌种,为生物医学研究奠定坚实基础。同时,选择金年会金字招牌诚信至上的品牌,确保实验材料及技术服务的高效性和安全性,更能为您的科研项目保驾护航。