## 羊口蹄疫病毒非结构蛋白抗体检测试剂盒使用说明书

### 产品名称

通用名称：羊口蹄疫病毒非结构蛋白抗体检测试剂盒（酶联免疫法）

英文名称：Test Kit for Antibodies to Sheep Foot and Mouth Disease Virus NSP (ELISA)

### 包装规格

96T×1/盒、96T×2/盒、96T×5/盒

### 预期用途

羊口蹄疫是一种由口蹄疫病毒（FMDV）引起的急性、高度接触性传染病，主要影响偶蹄动物，表现为口腔黏膜、蹄部及乳房皮肤出现水泡和烂斑。该试剂盒用于检测羊血清中的口蹄疫病毒非结构蛋白（NSP）抗体，可用于口蹄疫的野毒感染筛查及辅助诊断。

### 原理

本试剂盒包含预包被口蹄疫病毒非结构蛋白重组抗原的酶标板、酶标记物及其他配套试剂，通过酶联免疫法（ELISA）检测血清和血浆样本中的抗体。实验中，将对照血清与待检样本加入酶标板，若样品中含有NSP抗体，则与板上抗原结合。洗涤后加入酶标记物，并通过底物反应形成蓝色产物，显色深浅与样品中特异性抗体的含量正相关。最终，使用酶标仪在450nm波长下测定吸光值，以判断样品中是否存在NSP抗体。

### 试剂盒组成

1. 酶标记物：1ml (红盖) / 2ml (红盖) / 5ml (红盖)

2. 样品稀释液：50ml (黄盖) / 200ml (透明)

3. 20X浓缩洗涤液：40ml (白盖) / 200ml (透明)

4. 底物液A：6ml (白盖) / 11ml (白盖) / 26ml (白盖)

5. 底物液B：6ml (黑盖) / 11ml (棕盖) / 26ml (黑盖)

6. 终止液：6ml (黄盖) / 11ml (黄盖) / 26ml (黄盖)

7. 阳性对照：10ml (红盖) / 15ml (红盖) / 20ml (红盖)

8. 阴性对照：10ml (绿盖) / 15ml (绿盖) / 20ml (绿盖)

9. 酶标板：96T×1 / 96T×2 / 96T×5

10. 盖板膜、试剂使用说明书和稀释板

### 储存及有效期

请在2～8℃保存，有效期为12个月。开封后的包被板需避光保存，避免潮湿，使用期限为2个月。

### 适用仪器

需配备能检测450nm和630nm波长的酶标仪，以及37℃恒温设备和可调微量移液器。

### 样品准备

1. 采用常规方法分离动物全血制备清亮无溶血的血清。样品可在2～8℃下保存一周，长期则需置于-20℃。

2. 用样品稀释液将待检血清按10倍稀释。阴性和阳性对照无需稀释。

3. 使用前，浓缩洗涤液应恢复至室温，并用蒸馏水或去离子水稀释20倍。

### 检验方法

1. 使用前将试剂盒置于室温30分钟。

2. 选取酶标板条，设阴性和阳性对照各2孔，未用完的板条需尽快密封保存。

3. 向对照孔分别加入阴阳性对照100μl，样品孔加入稀释液90μl和稀释血清10μl。

4. 混匀后，盖好盖板膜，于37℃避光反应30分钟。

5. 洗涤步骤重复5次，最后一次后拍干。

6. 每孔加入酶标记物100μl，盖膜，再于37℃避光反应30分钟。

7. 重复洗涤步骤。

8. 依次加入底物液A和底物液B各50μl，混匀盖膜，于37℃避光反应10分钟。

9. 加入终止液50μl，混匀后测定各孔吸光值（A值）。

### 参考值

正常实验情况下，阴性对照应≤0.10，阳性对照应≥0.60。

### 检验结果的解释

样品A值≥0.38为阳性，样品A值＜0.38为阴性。阳性样本需结合临床、其他检测数据综合分析。

### 实验方法的局限性

本检测结果仅供筛查，不作为确诊依据。

### 注意事项

1. 实验操作需佩戴手套和工作衣，严格遵循消毒隔离制度，所有废弃物应按传染物处理。

2. 终止液具有腐蚀性，避免接触皮肤和衣物，若不慎接触请用大量自来水冲洗。

3. 酶标板须在恢复至室温后开袋，未使用的板需存放在有干燥剂的密封袋中。

4. 浓缩洗涤液需恢复至室温后使用，以确保完全溶解。

5. 清洗时需确保各孔液体充足，确保没有残留酶。

6. 被检测样品应保持新鲜。

7. 试验结果的判定以酶标仪读数为准。

8. 不同批号的试剂不能混用。

金年会金字招牌诚信至上，致力于提供高品质的生物医疗产品，确保实验的准确性与可靠性。